1、pcr需要的原料有物PCR引物为DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链酶dNTP模板和缓冲液PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温经常是60°C左右时引物与单链按碱基互补配对的原则结合；因为两个模板显示出形式不一样做的时候一般是提取植物总的RNA，然后采用OligodT或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA再以cDNA为模板进行PCR扩增，主要是获得目的基因或检测基因表达，判断目的基因mRNA转录水平的相对量的变；在PCR反应中，除了引物和模板，其他的试剂是完全一样的，为了防止在加样的过程中，造成其他试剂的污染，一定是把别的都取出来以后，再加引物，再加模板这样其他人，或者其他样品再用这些试剂的时候，相互污染的可能性小；你好，你要扩增哪里，那里就是你的说的目的片段和基因本身没有什么具体关系可以扩增基因内的一部分序列内含子也好外显子也好内含子+外显子也好，可以扩增基因外的间隔序列，完全是根据实验需要来定的。
2、没有模板多重pcr本身就是模板，导致没有模板，该产品是由进行构思并制作的模板，是指作图或设计方案的固定格式，有时也指DNA复制或转录时，用来产生互补链的核苷酸序列模板是将一个事物的结构规律予以固定化标准化的；那么PCR的结果就是987ABCD123456EFGH789 以上例子中，789 987被称为保护碱基，ABCD EFGH通常是酶切位点，123456就是目的基因，而模板中的abcd efgh在设计模板时可有可无；RNA做模板就是所谓的反向PCR了耐高温不是聚合酶的通性，聚合酶一般都不耐高温，所以虽然PCR的思想早就有了，但是因为没有耐高温的聚合酶所以才无法付诸实践，直到后来从水生栖热菌中发现了Taq才使得PCR被广泛使用；PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物PCR聚合酶链式反应是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温经常是60°C左右时引物与单链按碱基互补配对的。
3、聚合酶链式反应简称PCR英文全称Polymerase Chain Reaction， 聚合酶链式反应 简称PCR聚合酶链式反应，其英文Polymerase Chain ReactionPCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性低温退火复性及适温；首先，如果你的引物不存在相互的干扰，那么你可以试着放在一个体系里面做实验其次，引物设计按照标准的方法就可以 最后，实在是要用电泳的方法，并且你的片段大小相差较大的情况下可以使用琼脂糖，什么情况下用聚丙烯酰胺凝胶。
4、1一般普通的酶，DNA模板量在50到100ng都可以扩增出来的 2高效一点的酶，几ng也可以扩增出来的1PCR反应步骤类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物PCR由变性退火延伸三个；PCR分开扩增，2者或多者片段大于20bp可以混在一起 3730毛细管电泳可以区分出来。
5、其次是根据mix，算出总体积中mix使用的体积根据自己提取或者逆转录得到的DNA浓度，以及一次pcr反应所使用模板的量，计算出DNA的体积根据引物浓度以及引物使用的终浓度，计算出引物使用的量最后用总体积减去上面几部分的；PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补。
6、pcr的模板可以是蛋白质PCR模板制备是PCR实验的首要步骤，模板制备是从待分析样本中纯化和浓缩核酸DNA或RNA以作为PCR扩增模板的过程由于PCR用途多样，用于提取核酸的材料可能是全血动植物组织培养细胞口腔涂片体液；1引物，引物是PCR特异性反应的关键，PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度2酶，目前有两种聚合酶供应3dNTP，dNTP的质量与浓度与PCR扩增效率有密切关系，dNTP粉呈颗粒状4模板，模板核酸的量与纯化程度。
